RVLM微生物定量检测

一、主要特点

*2. 可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本

（基因搜寻）

*5.为检测更多的样品可多台机连接至同一台计算机同步使用，

*7.软体适用 JAVA 环境。

*9．三光波同时检测（蓝，绿，红）

*11.操作中如果翻盖则自动停止分析，具光波防护安全装置。

*13. 检测样本只需 1ml/1g；

*15.特异性高达 99.999%；

*17．仪器便携式，可随时随地进行检测、100%定量分析，并可直接连接电脑出定量分析检测报告。

17025:2005 标准的内部认证

→活菌总数

→大肠杆菌

→肠杆菌科

→绿脓杆菌

→李斯特菌

→ 还原亚硫酸盐梭状芽胞杆菌

→真菌类(如：曲霉菌等)

应用范围：

-食品（HACCP）

-水质

-药品及 化妆品

咖啡馆、餐厅

分析实验室和HACCP诊断

药厂、药房、化妆品厂

水配送公司

室内空调调节公司

-培养皿法

免疫法（抗原搜寻）

检验样本无需任何前处理

定性和定量分析

-肉眼判读：定性或半定量分析

-简单的三个步骤得到检测结果

-是传统检验方法速度的2～5倍

-可以检测到1目标微生物（理论极值）

-特异性高达99.999%（理论极值）

-微生物检测瓶随时可用

使用后安全丢弃

检测步骤:

先：放入样本

-放入液态（固态/表面）样本0.1~1.0ml（0.1~1.0g）

第二步：摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合

-若使用振荡器，需时20秒左右；

第三步：在适当时间判读结果（请查右表）

-充分溶解混合后立即放入检测仪

若没有RVLM微生物检测仪只有RVL检测瓶时：

    (在适当温度下孵育适当时间，请查下表)

以大肠菌群为例：

若菌落数＜102CFU/ml：14小时内颜色不会变成黄色；

或其他中间色（不变成黄色）

-按下RVL微生物检测瓶的瓶盖上方

1. 微生物检测瓶除可以检测活菌外，死菌可以检测么？

2. 微生物检测瓶可以检测厌氧菌么？

荚膜杆菌 Clostridium perfrigens），也包括需氧菌。

杆菌 Clostridium perfrigens。

答：培养皿法、酶法、免疫法、基因法。

答：与传统的培养基法、胶体金、酶免法和 PCR 法不同，德国微生物检测仪是多种方法的集

         PCR 法需要专业技术人员和昂贵设备；

胶体金法灵敏度低；

点，弥补了各种方法的不足。

答：都可以。

答：检测瓶是通过捕捉特异性，结合多种检测法进行分析。无菌环境与否均可（临检的场所大都是

7. 检测瓶可以检测表面样本和固态样本么？

粘稠状昂本都可以检测。

答：直接将样本放入检测瓶，无需任何前处理。

答：一般是 11ml。如果是检测液态样本或水样本，建议加样 1ml，加无菌水 10ml。

都是必要的步骤么？

11. 不同的微生物对应的孵育温度是一样的么?请举例说明。

请参考对照表。

答：对检测样本自身的温度没有限制，检测样本中微生物，请严格遵照所检测微生物对应的孵育温

13. 如果想加快检测时间，孵育温度可以调至高于所检测微生物对应的孵育温度？

14. 操作手册规定放入的样本量为多少？

15. 若放入的样本量高于规定的样本量，检测结果会不同，或者检测结果（定量时）增加么？

原因：传统的微生物学检测方法，包括参考方法，即基于固体选择性培养基的菌落计数法

准差和四分位距。）大于 50%。很多实验室已经证实生物检测法与其他检测方法比统计分散

同样应该考虑在

因此，加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的（和其他任何方法获得的结果相等）。

答：可以。

17. 对于酱油这样的深色样本，会影响定性检测结果的判读么？您有什么好的建议？

深色样本如果担心肉眼不能够清晰的辨认，建议进行稀释后再进行检测。还记得第 15 题得答案

同样的道理。

答：建议加水样 1ml，无菌水 10ml。

答：不同。

颜色为蓝色，阳性颜色为黄色。具体请参考对照表。

答：是的。将检测瓶充分摇匀后立即放入检测仪，在软件上进行检测菌类设置后。

21. 微生物检测仪兼备振荡器的功能么？

22. 微生物检测仪的判读原理是什么？

精确的定量分析检测报告。

答：外接电源。

答：8 个。同时、独立的探测，并分别给出定量分析报告。

答：需要按照配套分析软件。

答：XP, Vista, Windows 7

答：若初次开机，开机后停留 40 秒左右继续操作为宜。

入？

29. 检测瓶放入检测仪后，在检测仪分析软件点击开始，软件界面上对应检测孔的灯会变成什么颜

答：在所检测检测瓶对应的操作界面上点击“Start”（开始），对应孔的指示灯由绿色变为红色。表

30. 当检测结束后，分析软件界面对应孔的灯光会恢复为什么颜色，说明检测结束，可以放入新样

答：在检测进行时，指示灯为红色。当检测结束后，指示灯变为绿色。此时在对应的检测仪检测孔

时间）。

答：反比关系。即微生物含量越多，对应的检测时间越短；微生物含量越少，对应的检测时间越

如果样本中微生物含量过高，几分钟甚至几秒钟内检测仪的定量分析结果就会显著变动；

至几分钟的数据变化初步判断微生物目标含量是否达到规定要求。

物的存在量。）？

例如，根据国家 GB 标准，或根据国际 EC 标准等，都有明确（或部分明确）地注明微生物

具体地说，在进行微生物检测时，我们首先要明确检测目的。如、国际 EC 2073:2005标准中

超过 CFU 10^2。此时我们根据对招表，找到大肠杆菌所在列，查 log CFU 10^2=2，即在大肠杆

析，要检测样本中大肠杆菌含量是否超过 CFU 10^2，最长在 14 小时即可得到严格精准的分析结

如果是检测瓶进行定量分析，有经验的实验员会在很短时间内（譬如十几分钟）根据定量分析

33. 明确要检测微生物含量的目的是什么，对照表起到什么作用？

体的使用方法请参考上一题答案。

答：colony‐forming unit,菌落形成单位。

细菌（可见）和真菌的测量单位。CFU:colony‐forming unit,菌落形成单位，将稀释后的一定

活细胞就形成一个菌落。与常规利用显微镜对微生物数量进行测量不同，主要是对可见（即多数情

叫“个”。但是，我们知道，一个菌落并不一定是一个细菌所生成，也可能是由一簇细菌（一个细菌

像“公斤”和“千克”，只是叫法不同，数量上没有变化。

CFU/g 即对应固体培养基。

用肉眼观察瓶中颜色变化进行定性分析，请对照“孵育温度和比色对照表”详细叙述检测步骤。

放入所要检测的样本（0.1‐1.0g，或 0.1‐1.0ml），加入 11ml 无菌水（根据检测物情况，

如果用手需有力摇 2‐3 分钟左右；或用振荡器摇，需时 20 秒左右。

     (1)若肉眼定性分析。根据对照表确定大肠菌群对应的孵育温度、开始颜色、检测时间、阳性颜

孵育温度：根据对照表为 37℃；

检测时间：我们要检测标准为大肠菌群含量不超过 106CFU/g 或 106CFU/ml。根据对照表，对

时。

确定了以下信息后，我们把充分混合后的检测瓶放入 37℃恒温箱，这样一直放置。孵育 10 分

小时的时候进行观察，如果颜色变为黄色，说明样本中大肠菌群含量超过 106CFU/g 或

说明样本中大肠菌群含量未超过 106CFU/g 或 106CFU/ml，样本为合格品。

此步骤请参见下一题。

最后别忘记按下检测瓶的瓶盖上方对检测瓶进行灭菌处理。按下瓶盖后摇一摇，好了，可以安

注意：在进行实验操作时，不要碰到检测瓶的瓶盖顶部，以免在不当的时候进行了无菌处理，

36. 若第 34 题搭配检测仪进行精确的定量分析，请详述操作步骤。

将充分混合后的检测瓶立即放入检测仪。

所属客户、检测时间等信息）；在软件操作界面“analysis type”（检测种类）下拉菜单中勾选所检

开始进入分析状态。观察检测仪的定量分析数据变化，进行判断。

答：无菌处理。瓶盖中还有无菌处理物质，按下瓶盖，瓶盖中的无菌处理物进入瓶内，与瓶内溶剂

技术人员选答题，销售人员必答题：

答：活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、肠道杆菌科、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯

以后还有陆续有其他微生物菌种的检测瓶相继面世。包括军团菌等。

答：是的，可以检测到全部的大肠杆菌菌株，包括 EHEC 肠出血性大肠杆菌（E.coli O104, O111,

3. 检测瓶的应用范围有哪些？

疫、药品及化妆品。

公司，药厂、药房、化妆品厂，分析实验室和 HACCP 诊断，奶制品厂，咖啡馆、餐厅，消费者保

4. 你认为大肠杆菌检测瓶、李斯特菌检测瓶、沙门氏菌检测瓶除了是用于食品安全检测外，适用

答：大肠杆菌(EHEC)、李斯特菌、沙门氏菌，这三款检测瓶可用于体外临床检测。

检测是非常少的，欧洲的各方面安全控制的很好。然而，在发展中国家，以上三款微生物的人体体

4 合 1 试纸片和检测瓶市场定位的区别

 4 合 1 试纸片配合其分析仪，一台分析仪可以同时检测 48 个试纸片。因此，从经济成本的角

检测瓶，一个样本就可以进行检查。而且更大的优势在于，这款产品会非常受医生的欢迎。因

粪便样本放入后送回给医生。医生拿到检测瓶，在医院的振荡器上摇匀后，放入孵育机，等待结果

2）检测瓶与医院目前传统检测法的比较

果医生处于怀孕期，接触到李斯特菌的后果就是流产。如果检测台没有处理干净，也容易导致微生

检测瓶，医生完全不用接触样本。样本放入检测瓶的的这个过程交给病人在卫生间去操作就可以。

5. 无论固态、液态还是表面样本，在检测时是否都无需进行前处理？

6. 检测仪的特异性是多少？

7. 检测仪的灵敏度是多少？

8. 做定性分析时，检测需要几步，分别是什么？

忘记按下瓶盖上方进行无菌处理。

答：同上。具体请参考检测仪操作文档。

答：无菌处理，

答：在 20℃-25℃左右既可以储存，这个温度下很方便运输，对于临检来说是有利的。但随着大气

如果可以放到 4℃进行储存，保质期可以延长近一倍。

答：4℃。