TonkBio RT Reagent Kit

英文名称：TonkBio RT Reagent Kit（for qPCR）

产品描述：TonkBio RT Reagent Kit是专门用于两步法RT-PCR的第一步，含有反转录反应所需的全部试剂。具有较强的延伸能力的Tonescript M-MLV能够在短时间内高效的合成用于qPCR的cDNA。操作简单，适合进行高通量分析。可以配合SYBR Green法和Taqman探针法做下一步基因表达分析。

产品特点：

1、可以快速、高效合成qPCR用的cDNA，是两步法反转录的优选试剂。

2、提供了两种反转录引物，OligodT primer和Random primer，可根据具体反应情况使用。反转录时可以使用OligodT primer或Randomprimer，也可以两种引物同时使用。

3、反应仅需15分钟。

4、与qPCR试剂兼容性高。

应用举例：

常见问题解析：

1、 没有RT-PCR产物或产量低

◆RNA模板降解。RNA的纯度和完整对于反转录得到全长cDNA是非常重要的。提取

的RNA应进行电泳检测以确定其是否降解。同时RNA要避免反复冻融。

◆RNA模板纯度低。提取RNA的过程中，可能残留一些盐离子、试剂，如EDTA、酚、

胍盐、磷酸盐、多胺等抑制接下来的反转录反应。建议用75%乙醇（DEPC水配制）仔细清洗RNA沉淀。

◆引物不合适。选择合适的引物，当 RNA是细菌RNA或者是没有polyA尾的RNA要选择随机引物或者特异引物。

◆目的基因含有复杂二级结构或高GC含量。建议选择随机引物进行反转录，将反转录温度提高至55℃。

2、RNA 中混有基因组 DNA

◆为避免基因组DNA直接扩增造成结果不准确，①可以在反转录之前对RNA进行Dnase I 的消化，②引物设计时避免基因组扩增，跨较长内含子设计上下游引物。

3、阴性对照中有RT-PCR产物

◆阴性对照中有RT-PCR产物也表明有DNA的污染。在反转录之前可以对 RNA 进行 DNaseI的消化。
 

同科生物简介：成立于2007年，是一家集研发、生产、销售和技术服务于一体专注于生命医学和生物技术领域的高科技企业。主营业务有科研产品、诊断试剂、分子诊断和技术服务等，主要服务于科研机构、大专院校、医院和工业等客户。