液相色谱法检测豆制品中大豆异黄酮方案

    大豆异黄酮是大豆生长中形成的一种次级代谢产物。由于是从植物中提取，与雌激素有相似结构，当大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性，是天然的癌症化学预防剂。平时多食用富含大豆异黄酮的食物有助于抑制前列腺癌细胞的生长，膳食中的大豆异黄酮主要来自大豆和大豆制品。采用高效液相色谱仪分析测定豆制品中大豆异黄酮含量，建立了大豆异黄酮的高效液相色谱分析方法。

样品制备：
    称取10g大豆样品，用10倍量80%乙醇加热回流1h后，使用超声提取30min，将上清液用定性滤纸过滤，滤液移至100ml容量瓶中，用0.32μm滤膜的溶剂过滤器进行过滤；准确吸取液体样品10ml与离心管中，采用水浴氮吹仪在50℃温度下浓缩、结晶；用5ml乙腈-0.2%乙酸溶液溶解，0.32μm滤膜过滤后移入进样瓶中供液相色谱仪分析。

检测仪器：
    超高液相色谱仪（紫外检测器，四元泵，手动进样器）、氮吹仪

试剂：甲醇、乙腈（色谱纯）；水：重蒸水；样品制备用酒精为分析纯；异黄酮标准品大豆甙、黄豆甙、染料木甙、大豆甙元、黄豆甙元、染料木素。

色谱条件：
色谱柱：C18柱（150mm*6mm，5μm），流动相为乙腈溶液和乙酸溶液，流速为0.15ml/min，柱温：200℃，进样量5μL。

    使用溶剂过滤器处理制备样品，保证了样品纯度，有效防止样品中杂质对检测结果的影响；水浴氮吹仪对样品溶剂进行隔绝空气，高温加热结晶处理，更适于标准样品溶液的配置。液相色谱仪检测豆制品中异黄酮的方法重现性好，精密度高，回收率高。