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本产品可克服Taq DNA Polymerase的抑制因子如血红素、腐植酸、染料等的影响，并可提高PCR的扩增效率。对大多数检材均可直接进行扩增，不但检材用量少，还可省去提取DNA的烦琐操作，并大大减少了污染机会。
一、 试剂盒成分（200次，25μl反应体积/次）
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成 分prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" |
描 述 |
体 积 |
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5X PCR Reaction Mix |
5×浓缩液，在缓冲液中含有MgCl2，dNTP等 |
1.1ml×1管 |
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5X PCRboost |
5×浓缩液，可克服PCR抑制因子，增強扩增效果。 |
1.1ml×1管 |
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HS-Taq DNA Polymerase |
5 U/μl |
120μl×1管 |
二、DNA制备本系列产品对几乎对所有生物的有核细胞检材均可放入PCR扩增管中直接进行扩增，如1mm 直径左右带有血液、精液、或唾液等有核细胞的纸品或布料等固相检材；带有毛囊细胞的毛发一根；0.2ul左右的血液、精液、唾液等液体检材。有核细胞较少的尿液或胎儿羊水等液体检材，可先离心去掉部份上清后再混匀，取0.2ul左右的混合液直接放入PCR扩增管中进行扩增。
三、PCR扩增1、PCR反应混合物的配制：将以下试剂震荡混匀5 秒钟后短暂离心，25μl反应体积按以下比例混合 ：
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5X PCR Reaction Mix |
5 μl |
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5X PCRboost |
5 μl |
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Primer Set |
适量 |
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HS-Taq DNA Polymerase（5 U/μl） |
0.5 μl |
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样品DNA |
详见第二项 |
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ddH2O |
加至 25 μl |
2、PCR反应：本试剂盒的PCR 反应条件是在ABI 9700 型PCR 热循环仪上建立的。循环参数为：
prefix = st1 ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags" 95℃ 7minutes ＋ (94 ℃ 30 seconds＋61 ℃ 1minute ＋ 70 ℃ 1minute) × 5＋（92 ℃ 30 seconds＋ 61 ℃1minute ＋70 ℃ 1minute）× 25＋ 60 ℃ 45minutes ＋ 12℃ soak。