液相色谱实例:磺胺分析(药物分析)液相色谱仪
一、高效液相色谱仪的特点及应用范围
高效液相色谱仪是在经典液相色谱基础上,引入了气相色谱的理论,在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器,因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。
1.分离效率高:使用新型填充物,粒度可小于50微米,每米色谱柱的塔板数达5000以上。
2.分离速度快:采用高压输液泵,流动相压力高达300千克力/厘米2以上,流速远比经典液 相色谱法为快,分离速度可与气相色谱法相比。
3.灵敏度高:流出液流经紫外或荧光等检测器,可直接检出低至10-13~10-10克的物质。
4.应用范围广:可以测定高沸点、热不稳定等不宜于用气相色谱法测定的大分子量的化合物。环境中的一些致癌物质如黄曲霉毒素、多环芳烃以及除莠剂、杀虫剂等都可以用高效液相色谱法进行快速、灵敏的分析测定。大气飘尘的多环芳烃从两环的萘至五环的苯并(a)芘等10多种化合物,在半小时内便可分离测定。应用紫外检测器可以检知含量为纤克/米3级的多环芳烃。
正是因为高效液相色谱法具有如此多的优点,所以又被称为现代液相色谱法、高雅液相色谱法、高速液相色谱法。
二、液相色谱实例:磺胺分析(药物分析)高效液相色谱仪
样 品:磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑和甲氧苄氨嘧啶的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,740色谱数据处理机
检测器:UV 481型紫外检测器,波长240nm
色谱柱:μ-Bondapak C18 , 5μm,柱长25 cm,柱径4.6 mm
流动相:由KH2PO4(0.05mol/L)和Na2HPO4(0.05 mol/L)以及MeOH所组成,其用量比例为200:10:165,
流 速:1mL/min
进 样:10μL
结 果:所有组分在6min之内全部流出,各组分完全分离,组分出峰顺序为:磺胺保留时间为2.60 min, 磺胺嘧啶保留时间为3.18 min、磺胺甲基异噁唑保留时间为4.33 min,甲氧苄氨嘧啶保留时间为5.19min。