详细说明
上海卓康以质量为本,树立“卓康质量”是公司的发展目标。我们一直加倍努力,竭尽全力做到不辜负您的支持与信赖。同时公司也离不开广大客户的帮助支持,真诚邀请国内外有实力的实验室、生物技术公司合作,共同发展。
目前卓康提供的服务范围包括:生物合成siRNA、shRNA的制备;转录编码shRNA的DNAs、转录编码shRNA的质粒载体订购;siRNA靶位的设计和实验选择分析;siRNA相关试剂和RNA技术相关产品的代理销售;重组病毒构建包装;基因蛋白表达、载体构建、多克隆抗体和单克隆抗体制备;多种细胞学服务;常用的分子生物学试剂、实验仪器、实验耗材销售等。
卓康在分子生物学和免疫学实验技术,特别抗体制备技术方面同样具有丰富经验,提供快速、优质、性价比高的实验服务。
十三、代做实验流式细胞术检测服务
1、检测指标:
1)DNA倍体分析、DNA含量分析、细胞周期、细胞凋亡。
2)细胞表面抗原分析:淋巴细胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相关抗体分析、HLA-B27、PNH相关抗原检测(CD55/CD59)、胞内细胞因子检测等。
3) 其它指标:细胞内钙离子测定、耐药基因检测(p170、MRP、LRP)及凋亡基因(P53、CD95、c-erb B2、Bcl-2及Bax等。
2、样本及来源:
1) 单个细胞:1~2×106 个细胞左右;来源于人、小鼠、大鼠或其它。
2) 外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;来源于人、小鼠、大鼠或其它。
3、收费标准:
编号 规格 价格(¥)
FWO-1 单色标记 50/T
FWO-2 双色标记 70/T
FWO-3 三色标记 90/T
说明:
1、 实验所用的流式细胞仪为COULTER EPICS XL。
2、 送检样本量:
1)单个细胞:1~2×106 个细胞左右;来源于人、小鼠、大鼠或其它。
2)外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;来源于人、小鼠、大鼠或其它。
3、 用户需要进行流式细胞仪检测时须提前预约,同时说明实验目的、方法等。一次送检标本数不少于10个。如果一次送检标本总数不足10个,每个测试费用为标准收费×2。
4、 我公司在正式接受实验委托一周内交付实验结果。所提供实验结果忠实于样本的实际情况。
5、 用户须一次性全额预付实验费。
6、 部分常用荧光探针,如PI等,我公司可免费提供,;特殊标记物,如CD抗体等,用户须另行购买,也可委托我公司代购;用户所提供抗体应可与样本发生特异性识别反应。
7、 由用户提供的样品或试剂所致的实验问题由用户负责。
8、 请在表中说明检测具体要求(可另附页),由于填写资料不详所致任何问题由用户负责。
9、 请在送样的同时提供样本来源及处理方法等信息,样品检测后原则上本公司不负责保存。
附:流式细胞术检测样品推荐制备方法:
A. 直接标记抗体(FITC标记抗体):
(1) 收集1×106个细胞,800rpm离心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟,800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞,800rpm离心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬细胞,冰上孵育10min,800rpm离心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和饱和剂量的荧光标记抗体(5×105个细胞/20ul抗体)的PBS ,避光冰上放置30min,离心弃上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待测即可。
(4) 用流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。
B. 未标记抗体间接免疫荧光标记法:
(1)收集2×106个细胞,用冷的PBS 2ml 洗涤细胞一次,800rpm离心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室温固定细胞40min,800rpm离心5min;2ml PBS重悬细胞,800rpm离心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重悬细胞,冰上放置10min,800rpm离心5min。
(4)加入饱和剂量未标记抗体,冰上放置40min,800rpm离心5min,用2ml冷的PBS 重悬细胞,800rpm离心5min,洗去未结合一抗,重复一次。
(5)加入荧光标记(FITC)标记的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm离心5min,去上清,PBS洗涤两次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重悬细胞;固定待测。
(7)流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。
C.细胞周期、细胞凋亡及DNA倍体分析样品(PI染色)的制备:
(1)待测样本制成单细胞悬液,然后200g离心5分钟,弃上清。
(2)用4℃预冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小时。
(3)调整细胞浓度为106细胞/毫升,取1毫升细胞悬液,用PBS洗三次,细胞重悬于1毫升PI染液中,37℃孵育30分钟即可进行流式分析。
(4)PI染液终浓度为50微克/毫升,RNase A终浓度为20微克/毫升。
注:本方法仅供参考,如有其它要求,请在送样前说明。
上海卓康生物科技有限公司
联系电话:021-55660344,021-55063976
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公司对外邮箱:sales@elisabio.com,hyperheal@gmail.com
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