杭州希跃科技有限公司

一、色谱柱的构造：
柱管、压帽/卡套、筛板（滤片）、接头
分析型
常规分析柱（4.0/3.9mm、4.6mm）
窄径柱（1.0mm、2.1mm）
毛细管柱（0.2-0.5mm）
制备型
半制备柱（〉5mm，7.8mm、9.8mm、10mm）
制备柱（21.2mm、30mm、50mm）
保护柱
保护柱套
保护柱芯
二、色谱柱填料基质：
1. 硅胶基质- pH 2-8 ------------------ 高或低pH下, 硅胶会溶解
2. Al2O3 . nH2O - pH1-14-----------化学修饰困难
3. 聚合物基质 - pH1-14-------------孔结构复杂, 孔径不均匀导致柱效不够高, 有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损
三、C18色谱柱---性能影响因素
A:物理因素1.硅胶纯度 ----• 填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度
2.色谱柱尺寸---• 填料床的长度和内径
3.颗粒形状------• 球型或不规则型
4. 粒径------------• 平均颗粒直径, 通常3-10µm
5.表面积---------• 颗粒外表面和内部孔表面的总和, 以m2/gram表示
6.孔径------------• 颗粒的孔或腔的平均尺寸, 范围80-300Å
B：化学性质
1.键合类型----- • 单体键合 - 键合相分子与基体单点相连
2.碳覆盖率------• 与基体物质相连的键合相的量
3.封端------------• 键合步骤之后, 用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来
四、如何推荐色谱柱
在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等，
1.样品是极性的且弱酸性的；就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱
2. 如果样品极性太强，或酸性太强；可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC（亲水色谱），也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱（缺点是离子对试剂平衡时间长，对流动相pH要求比较精密，否 则很难重复实验，另外离子对试剂很难洗下来，基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验）
3. 若样品是碱性的；可选择高纯硅胶柱（高纯硅胶缺少金属杂质，且硅胶端基封尾）或一些经过修饰的C18柱（如极性嵌入技术或碱去活技术等），他们都会减少碱性化合物的拖尾，一般会选择中性或偏碱的条件下做，因为这样可增加碱性样品的保留
4.如果碱性化合物的极性太强，或碱性太强；可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测（优点是方法开发简单，缺点是目前实 现这一技术的色谱柱品牌比较少，价格也高）或者选用HILIC色谱柱（硅胶柱在反相条件下使用，这也是很经典的检测碱性样品的方法）选择强离子交换柱（缺点 是不能用来分析其它样品，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验）也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱