甲型H7N9禽流感作为一种人禽共患传染病,卫生、动物疫病监测机构等各类诊断实验室均会接触该病毒样本或感染病原体,此类实验室的生物安全应得到高度重视。在做好实验人员个体防护的同时,对已暴露区域的空气和物表进行高水平消毒,特别是对生物安全柜、诊断实验过程中使用的器材和实验室核心区域整体的有效处理,尤为重要。小型化或抛弃式的器材,通过高压蒸气等方式进行灭活处理,此类方法是安全且容易验证的。更具有挑战性的工作是对污染的生物安全柜、离心机、二氧化碳培养箱等较大型设备去污,以及实验室环境的整体消毒。
生物安全实验室的消毒方式
采用紫外线照射和甲醛薰蒸是目前大部分生物安全实验室采用的消毒方法。紫外线照射易受到的影响因素较多,因照射距离、遮挡等原因,存在许多消毒盲区,难以保障消毒效果。对于生物安全实验室,紫外线照线只能作为辅助消毒方法。甲醛薰蒸作为一种有效的消毒措施已使用多年,可杀灭包括细菌芽孢在内的多种病原微生物,但需要较长的消毒时间,且残留的化学毒性危害已被人所共知。过氧乙酸和含氯消毒剂亦可被用来作喷雾和表面擦拭消毒,但对设施设备等材料具有较强的腐蚀性。
利用气态过氧化氢(VHP)对生物安全实验室进行生物去污会是一种更好的选择。将浓度30%~35%的过氧化氢溶液,通过氧化氢发生器在70~140℃条件下进行连续闪蒸。过氧化氢闪蒸过程中产生高活性的羟基,能够破坏生物体的细胞膜、脂类、蛋白质和DNA,具有广谱杀菌效力。在消毒后,过氧化氢蒸气分解为水和氧气,对环境和人员均无害。
气态过氧化氢对H7N9禽流感病毒的杀灭有效性
H7N9禽流感病毒与H1N1甲型流感病毒同属正粘病毒科,美国StephenN. Rudnick等人使用气态过氧化氢对表面的流感病毒进行灭活试验,研究结果表明:含有流感病毒的载体暴露于10ppm过氧化氢气体浓度,作用2.5分钟后,导致了同类型的H1N1甲流病毒99%的失活。较低的浓度即可达到理想的灭活效果,在此低浓度下,过氧化氢对实验室设施、设备没有潜在的危害。
过氧化氢发生器的类型和作用方式
根据使用方式的不同,最常见的过氧化氢发生器有两种不同的作用形式,即管道输送型(室外使用)和内置散射型(室内使用),管道输送型发生器更适合生物安全柜、隔离器这类设备的去污处理。由于我国大部分生物安全实验室在设计时并没有预留与发生器对接的管道接口,且室外输送通常需要在房间内使用风扇进行均流,使得管道输送型发生器在实验室整体环境消毒中的应用受到了较大限制。内置散射型发生器可以看作管道输送型的改进,将发生器置于待消毒房间的内部,使用无线或有线连接的控制器,在房间外部控制发生器,进行多向喷射气体,完成消毒工作。一种最新型的汽化过氧化氢发生器,与智能行走机器人技术相结合,使用WIFI无线控制技术和锂电池组供电,已实现在特定环境中的运动状态消毒,可用于结构复杂的环境去污。
图1 不同类型的汽化过氧化氢发生器
生物安全实验室采用汽化过氧化氢发生器消毒的应用案例
图2 生物安全柜消毒
图3 BSL-3实验室排风高效过滤器原位消毒
图4 BSL-3实验室整体消毒
汽化过氧化氢发生器已在国内外较多的P3和P4生物安全实验室中得到应用,并取代了甲醛薰蒸。使用商品化的嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus ATCC#7953)作为生物指示剂,在有效的作用条件下,生物指示剂上芽孢数量能达到6-log减少,以此来监测消毒效果。
小结
汽化过氧化氢发生器应用于H7N9禽流感病毒诊断等各类生物安全实验室消毒,具有独特的技术优势:除了对各类病原微生物杀灭效力较强,且均匀分布外,其气态形式更容易穿透生物安全柜高效空气过滤器和实验室排风过滤器,以避免消毒死角。这一点是干雾等类别的过氧化氢消毒装置无法做到的。有关不同类别过氧化氢消毒装置的技术分析,笔者将在后续的文章中予以说明。
H7N9禽流感病毒已出现变异,实验室的生物安全需引起高度重视!
浙江泰林生物技术股份有限公司研发并生产多种规格汽化过氧化氢消毒机,包括管道输送型、内置散射型、两用型、车载型和智能行走消毒机器人等多种规格,均为国内首创,为国家十三五重大科技专项“生物安全关键装备研究——汽化过氧化氢发生器”课题承担单位,其汽化过氧化氢消毒(VHPS)技术已在国内外各类生物安全实验室中得到较为广泛的应用。
参考文献:
Stephen N. Rudnick,James J.McDevitt Inactivating influenza viruses on surfaces using hydrogen peroxide or triethyleneglycol at low vapor concentrations
American Journal of Infection Control December 2009