概述
活菌细胞浓度测量在发酵过程中具有非常重要的作用。通过它可以了解生物反应器中菌体或细胞生长状况,也可以了解一些描述菌体或细胞生长或生产能力的间接参数,如比生产速率,比基质消耗速率,细胞代谢流衡算等。
然而由于活细胞浓度传感技术的困难,传统的测量方法还是通过手工取样测量。操作复杂,滞后时间长。尤其是在解决区分培养基颗粒,微载体,丝状菌浓度检测等问题上都有局限性。
活菌细胞浓度测量在发酵过程中具有非常重要的作用。通过它可以了解生物反应器中菌体或细胞生长状况,也可以了解一些描述菌体或细胞生长或生产能力的间接参数,如比生产速率,比基质消耗速率,细胞代谢流衡算等。
然而由于活细胞浓度传感技术的困难,传统的测量方法还是通过手工取样测量。操作复杂,滞后时间长。尤其是在解决区分培养基颗粒,微载体,丝状菌浓度检测等问题上都有局限性。
ABER原位活细胞在线检测仪的基本功能与应用
功能: ABER能实时在线检测发酵罐内活细胞的浓度,密度,干重,生物量体积,电容大小,导电率大小;而不受细胞碎片,细胞团块,死细胞,发酵液泡沫,微载体颗粒等影响。
适用范围:动植物细胞,酵母,细菌藻类等种类的研究和生产质量控制。
认证: 广泛适用于发酵生产工艺中的质量控制。符合ISO,FDA,cGMP等认证。
功能: ABER能实时在线检测发酵罐内活细胞的浓度,密度,干重,生物量体积,电容大小,导电率大小;而不受细胞碎片,细胞团块,死细胞,发酵液泡沫,微载体颗粒等影响。
适用范围:动植物细胞,酵母,细菌藻类等种类的研究和生产质量控制。
认证: 广泛适用于发酵生产工艺中的质量控制。符合ISO,FDA,cGMP等认证。
原理——双电极电容法
1987年Kell首先描述了测量细胞量的双电极性质。生物量测量是采用图中所示的4个铂金电极,外面两个外电极产生一个交变的电场,两个内电极测量电压。在缓冲液环境中,两个外电极间使溶液内的离子向相反方向移动形成溶液的电导率。
活细胞细胞膜完整,在电场中被极化而形成电容。而这个电容值会被ABER 准确检测出来,用已标志生物量(BIOMASS)不同的细胞种类会有不同的电容值。其大小和细胞的体积也呈一定比例。而死细胞(膜破裂),气泡或是细胞碎片因不能形成一个电容,所以ABER将不会将其检测到。
ABER的探头由FDA所认证的材料316L钢所构成,保证其精度和耐用度。可经受原位蒸汽灭菌。
ABER的应用的实例:
一 微载体培养培养监测:传统方法对通过微载体来培养的动物细胞计数相当困难。需要离线取样再计数细胞核,但是却没有办法对其中活细胞的数目作出准确判断;由于载体材料是均一的,不能形成电容。ABER能够检测出微载体中活细胞的数目,而且不受微载体颗粒的影响。
二 丝状菌生长状态监测:丝状菌发酵(如抗生素生产)中容易产生丝状菌结团、结球,没有明显的细胞界限。传统的方法(如浊度法,染色法)会产生很大的误差。在评估菌生长情况或放大罐移种菌量时只能通过“经验”来判断;ABER能够准确测量出丝状菌包括团块中的生物量,避免由于经验不足造成产量下降。
三 监测发酵一致性,方便做发酵放大研究:ABER220系列可以配上多个探头,同时监测多个发酵罐发酵情况。结合各种检测参数,了解菌体或细胞的生长情况以判断“收割”最佳时间。
四 监测在线发酵过程,方便做发酵过程优化研究与生产控制:对灌注发酵罐中细胞的浓度进行监控,指导细胞返罐量和地物流加速率可促进重组蛋白生产自动化,并提高产量及降低纯化难度;同时结合其他检测参数也可以更加容易判断染菌,菌丝体“自溶”等现象。
关于英国ABER
英国Aber-instruments是上世纪80年代基于电容法开发出活细胞浓度在线分析仪,Aber活细胞浓度在线分析仪解决了微生物发酵过程和动植物培养过程中实时在线生物量的检测问题,在随后20多年的时间里一直是行业的领导者。